谷胺酰胺合成酶（GS）試劑盒 說明書 技術文章
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谷氨酰胺合成酶（Glutamine Synthetase，GS）活性檢測試劑盒
商品貨號：MS1807
英文名稱：Micro Glutamine Synthetase（GS）Assay Kit
別名：谷氨酰胺合成酶試劑盒 GS Kit 谷氨酰胺合成酶（GS)試劑盒 谷氨酰胺合成酶（GS)測試盒
檢測方法：微量法
| 商品貨號： | 商品品牌： | 規格 | 基本售價 | 選擇規格 |
|---|---|---|---|---|
| MS1807-100管/48樣 | 索橋生物 | 100管/48樣 | ￥550.00元 |
- 產品詳細介紹
測定意義：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物體內氨同化的關鍵酶之一，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。
測定原理：
GS在ATP和Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進一步轉化為γ─谷氨酰基異羥肟酸，在酸性條件下與鐵形成的絡合物在540nm處有大吸收峰，可用分光光度計測定。
- 產品說明書
貨號: QS1807 規格：50管/24樣
谷胺酰胺合成酶（Glutamine synthetase，GS）試劑盒說明書 可見分光光度法
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物體內氨同化的關鍵酶之一，催化銨離子和谷 氨酸合成谷氨酰胺，不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要儲 存和運輸形式。
測定原理：
GS 在 ATP 和 Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進一步轉化為 γ ─ 谷氨酰基異羥肟酸，在酸性條件下與鐵形成紅色的絡合物；該絡合物在 540nm 處有大吸收峰， 可用分光光度計測定。
自備實驗用品及儀器：
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰和 蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：30mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：10mL×1 瓶，-20℃保存。
試劑二：10mL×1 瓶，-20℃保存。
試劑三：粉劑×2 瓶，-20℃保存。用時每瓶加入 5mL 蒸餾水充分溶解備用，用不完的試 劑仍-20℃保 存。
試劑四：10mL×1 瓶，4℃避光保存。
樣本測定的準備：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液），超 聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000g 4℃ 離心 10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織， 加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
1、分光光度計預熱 30min 以上，調節波長至 540nm，蒸餾水調零。
2、在 EP 管中加入下列試劑：
試劑名稱（μ L） 測定管 對照管
試劑一 320
試劑二 320
試劑三 140 140
樣本 140 140
混勻，37℃（哺乳動物）或 25℃（其他物種）準確水浴 30min
試劑四 200 200
混勻，靜置 10min 后，5000g，25℃離心 10min，取上清液測定 540nm 處的吸光值 A?！鰽=A 測 定管-A 對照管。每個測定管需設一個對照管。
GS 活力單位的計算：
1、血清（漿）GS 活性 單位定義：每 mL 血清（漿）在每 mL 反應體系中每 min 使 540 下吸光值變化 0.01 定義為一個 酶活力單位。
計算公式：
GS（U/mL）=Δ A×V 反總÷V 樣÷0.01÷T =19×Δ A
2、組織、細菌或細胞 GS 活性
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每 min 使 540nm 下吸光值變化 0.01 定義為一 個酶活力單位。
GS（U/mg prot）＝Δ A×V 反總÷（Cpr×V 樣）÷0.01÷T =19×Δ A÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每 g 組織在每 mL 反應體系中每 min 使 540nm 下吸光值變化 0.01 定義為一個酶 活力單位。
GS（U/g 鮮重）＝Δ A×V 反總÷(W× V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T =19×Δ A÷W
（3）按細菌或細胞密度計算 單位定義：每 1 萬個細菌或細胞在每 mL 反應體系中每 min 使 540nm 下吸光值變化 0.01 定義 為一個酶活力單位。
GS（U/10^4 cell）＝Δ A×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T =0.038×Δ A
V 反總：反應體系總體積，0.8mL； V 樣：加入樣本體積，0.14mL；V 樣總：加入提取液體積， 1 mL；T：反應時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或 細胞總數，500 萬。
系列產品及單價
| 氮代謝系列 | ||||
| QS1800 | 硝酸還原酶(NR)測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 240 |
| MS1800 | 硝酸還原酶(NR)測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 450 |
| QS1801 | 谷氨酸合成酶（GOGAT）測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 500 |
| MS1801 | 谷氨酸合成酶（GOGAT）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 950 |
| QS1802 | 谷氨酰胺酶（GLS)測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 580 |
| MS1802 | 谷氨酰胺酶（GLS)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1100 |
| QS1803 | 谷氨酸脫氫酶（GDH）測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 580 |
| MS1803 | 谷氨酸脫氫酶（GDH）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1100 |
| QS1805 | 水土中亞硝酸鹽含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 140 |
| MS1805 | 水土中亞硝酸鹽含量測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 270 |
| QS1806 | 食品中亞硝酸鹽含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 200 |
| MS1806 | 食品中亞硝酸鹽含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 380 |
| QS1807 | 谷氨酰胺合成酶（GS)測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 280 |
| MS1807 | 谷氨酰胺合成酶（GS)測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 550 |
| QS1808 | 植物硝態氮測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 360 |
| MS1808 | 植物硝態氮測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 700 |
| QS1811 | 植物氨態氮測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 500 |
| MS1811 | 植物氨態氮測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 960 |
| QS1812 | 尿素氮測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 70 |
| MS1812 | 尿素氮測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 100 |
| QS1813 | 亞硝酸還原酶(NiR)測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 650 |
| MS1813 | 亞硝酸還原酶(NiR)測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 1250 |
| QS1814 | 脲酶（UE）測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 380 |
| MS1814 | 脲酶（UE）測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 750 |