硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR） 活性測定試劑盒 技術文章
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硫氧還蛋白氧化還原酶（Thioredoxin Reductase, TrxR） 活性測定試劑盒
商品貨號：QS1110
英文名稱：Oxidized Thioredoxin Reductase (TrxR) Assay Kit
別名：硫氧還蛋白氧化還原酶試劑盒 TrxR Kit 硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）試劑盒 硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測試盒
檢測方法：常量法
| 商品貨號： | 商品品牌： | 規格 | 基本售價 | 選擇規格 |
|---|---|---|---|---|
| QS1110-50管/48樣 | 索橋生物 | 50管/48樣 | ￥250.00元 |
- 產品詳細介紹
測定意義：
TrxR是一種NADPH依賴的包含FAD結構域的二聚體硒酶，屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員，與硫氧還蛋白以及NADPH共同構成了硫氧還蛋白系統。TrxR與GR活性類似，催化GSSG還原生成GSH，是谷胱甘肽氧化還原循環關鍵酶之一。
測定原理：
TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+，TNB在412 nm有特征吸收峰，通過測定412nm波長處TNB的增加速率，即可計算TrxR活性。
- 產品說明書
貨號：QS1110 規格：50 管/48 樣
硫氧還蛋白氧化還原酶（thioredoxin reductase, TrxR） 活性測定試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
TrxR 是一種 NADPH 依賴的包含 FAD 結構域的二聚體硒酶，屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化 還原酶家族成員，與硫氧還蛋白以及 NADPH 共同構成了硫氧還蛋白系統。TrxR 與 GR 活性類似， 催化 GSSG 還原生成 GSH，是谷胱甘肽氧化還原循環關鍵酶之一。
測定原理：
TrxR 催化 NADPH 還原 DTNB 生成 TNB 和 NADP+，TNB 在 412 nm 有特征吸收峰，通過測定 412nm 波長處 TNB 的增加速率，即可計算 TrxR 活性。
自備實驗用品及儀器： 可見分光光度計、低溫離心機、可調節移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體 90mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 5 mL 蒸餾水溶解。
粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加 入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時 間 3min）；然后 8000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體：直接測定。
TrxR 測定操作：
1. 分光光度計預熱 30 min，調節波長到 412nm，用蒸餾水調零。
2. 試劑一在 25℃（一般物種）或者 37℃（哺乳動物）預熱 30min。
3. 測定管：取 1mL 玻璃比色皿，加入 100μ L 試劑二，100μ L 試劑三，700μ L 試劑一，100μ L 上清液，迅速混勻后于 412 nm 測定 10 s 和 310 s 吸光度，記為 A3 和 A4。△A 測定管=A2-A1。
TrxR 活性計算公式：
(1). 按蛋白濃度計算
活性單位定義：在 25℃或者 37℃中，每毫克蛋白每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。
TrxR（nmol/min /mg prot）=△A 測定管÷ε ÷d×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T = 147×△A 測定管÷Cpr
(2). 按樣本質量計算
活性單位定義：在 25℃或者 37℃中，每克樣本每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。
TrxR（nmol/min /g 鮮重）=△A 測定管÷ε ÷d×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T= 147×△A 測定管÷W
（3）按細胞數量計算
活性單位定義：在 25℃或者 37℃中，每 104個細胞每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單 位。
TrxR（nmol/min/104 cell）=△A 測定管÷ε ÷d×V 反總÷(細胞數量×V 樣÷V 樣總)÷T = 147×△A 測定管÷ 細胞數量
（4）按液體體積計算
活性單位定義：在 25℃或者 37℃中，每毫升液體每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。
TrxR（nmol/min /mL）=△A 測定管÷ε ÷d×V 反總÷V 樣÷T = 147×△A 測定管
ε ：TNB 在 412nm 處的微摩爾消光系數，0.0136 L/μ mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總： 反應體系總體積（L），1000μ L=0.001 L；Cpr：上清液蛋白質濃度（mg/mL），需要另外測定； V 樣：加入反應體系中上清液體積（mL），100μ L=0.1 mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；W， 樣本質量，g；T：反應時間（min），5 min。
注意事項:
1. 測定前須先取 1～2 個樣做預實驗，哺乳動物組織及血液制品 TrxR 活力測定時，一般須用 蒸餾水稀釋 5 倍左右；測定過程操作須迅速。
2. 試劑二和試劑三配制好后 3 天內使用完。
系列產品及單價
| 輔酶Ⅱ系列 | ||||
| QS1100 | 輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 550 |
| MS1100 | 輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 1000 |
| QS1101 | NADP磷酸酶（NADPase）測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 520 |
| MS1101 | NADP磷酸酶（NADPase）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 980 |
| QS1102 | 6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 160 |
| MS1102 | 6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 300 |
| QS1103 | 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 260 |
| MS1103 | 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 500 |
| QS1104 | NADP蘋果酸酶（NADP-ME）測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 320 |
| MS1104 | NADP蘋果酸酶（NADP-ME）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 600 |
| QS1105 | NAD-蘋果酸酶（NAD-ME）測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 350 |
| MS1105 | NAD-蘋果酸酶（NAD-ME）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 650 |
| QS1106 | 6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶（6PGDH）測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 750 |
| MS1106 | 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6PGDH）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1400 |
| QS1107 | 肌酸激酶(CK)測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 820 |
| MS1107 | 肌酸激酶(CK)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1500 |
| QS1108-10 | 脂肪酸合成酶（FAS）測試盒 | 紫外分光光度法 | 10管/9樣 | 1200 |
| QS1108-25 | 脂肪酸合成酶（FAS）測試盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24樣 | 2000 |
| QS1108-50 | 脂肪酸合成酶（FAS）測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 3200 |
| MS1108 | 脂肪酸合成酶（FAS）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 6000 |
| QS2508 | 蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 1600 |
| MS2508 | 蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 3000 |
| QS1110 | 硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 250 |
| MS1110 | 硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 450 |
| QS1111 | 谷胱甘肽還原酶（GR）測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 260 |
| MS1111 | 谷胱甘肽還原酶（GR）測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 500 |