BCA 法蛋白含量測定試劑盒 說明 技術文章
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BCA 法蛋白含量測定試劑盒
商品貨號：QS3202
英文名稱：BCA Protein Assay Kit
別名：BCA法蛋白含量測定試劑盒
檢測方法：常量法
| 商品貨號： | 商品品牌： | 規格 | 基本售價 | 選擇規格 |
|---|---|---|---|---|
| QS3202-50管/48樣 | 索橋生物 | 50管/48樣 | ￥100.00元 |
產品詳細介紹
測定意義：
樣品可溶性蛋白質含量常常用于酶活性計算。此外，可溶性蛋白質含量也用于食品等質量分析。
測定原理：
堿性條件下，蛋白質中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵，能將Cu2+還原成Cu+；2分子的BCA與Cu+結合，生成紫色絡合物，在540-595nm有吸收峰，562nm處吸收峰大。
產品說明書
貨號: QS3202 規格：50 管/48 樣
BCA 法蛋白含量測定試劑盒說明書 可見分光光度法
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定，
測定意義：
樣品可溶性蛋白質含量常常用于酶活性計算。此外，可溶性蛋白質含量也用于食品等質量 分析。
測定原理：
堿性條件下，蛋白質中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵，能將 Cu2+還原成 Cu+； 2 分子的 BCA 與 Cu+結合，生成紫色絡合物，在 540-595nm 有吸收峰，562nm 處吸收峰大。
自備實驗用品及儀器：
臺式離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、移液器、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑 A：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑 B：液體 1mL×1 支，4℃保存。
標準蛋白：液體 2 mL×1 支，4℃保存。
工作液配制：臨用前請根據擬用工作液體積（樣本數×1 mL），將試劑 A 和 B 按照 50：1 的比例混合，蓋緊后充分混勻。
樣品中可溶性蛋白質提取：
1. 液體樣品：澄清無色液體樣品可以直接測定。
2. 組織樣品：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織， 加入 1mL 提取液（自備），根據需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水） 冰浴勻漿，8000g，4℃離心 10min，取上清，即待測液。
3. 細菌、細胞：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 8000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
測定操作：
1. 分光光度計預熱 30min，調節波長到 562 nm，蒸餾水調零。
2. 工作液置于 60℃水浴預熱 30 min。
| 空白管 | 標準管 | 測定管 | |
| 蒸餾水（μ L） | 20 | ||
| 標準品（μ L） | 20 | ||
| 待測液（μ L） | 20 | ||
| 工作液（μ L） | 1000 | 1000 | 1000 |
| 混勻后置于 60℃保溫 30min，于 1mL 比色皿在 562nm 處測定吸光值 A，分別記為 A 空白管、A 標準管、A 測定。 | |||
注意：空白管和標準管只需要做一次。
計算公式：
Cpr (mg/mL) = C 標準品×（A 測定管－A 空白管）÷（A 標準管－A 空白管） = 0.5×（A 測定管－A 空白管）÷（A 標準管－A 空白管）
Cpr (mg/g)= C 標準品×（A 測定管－A 空白管）÷（A 標準管－A 空白管）÷ W = 0.5×（A 測定管－A 空白管）÷（A 標準管－A 空白管）÷ W
W: 樣本質量，g
注意事項：
BCA 法蛋白含量測定試劑盒，適用于測定蛋白濃度在 20-5000μ g/ml 樣品。測定前取 1-2 個樣 做預實驗，若 A 測定管－A 空白管﹥1.5，需將樣本用提取液稀釋后再測定，以確保測定的準 確性。
| 蛋白含量測定系列 | 價格 | |||
| QS3200-50 | 雙縮脲法蛋白含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 60 |
| MS3200 | 雙縮脲法蛋白含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 100 |
| QS3201-50 | 考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 60 |
| MS3201 | 考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 100 |
| QS3202 | BCA蛋白法含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 100 |
| MS3202 | BCA蛋白法含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 190 |